U članku razmotrite što je to - PCR dijagnostika? Humani papiloma virus (HPV) danas je vrlo česta bolest koja se javlja u kroničnom obliku i prepuna je čestih recidiva. Lančana reakcija polimerazom (PCR) je najsuvremenija metoda za dijagnosticiranje papiloma virusa. Ova se metoda smatra vrlo pouzdanom i pomaže identificirati ne samo prisutnost ovog virusa u ljudskom tijelu, već i njegovu količinu i raznolikost. PCR analiza na HPV osjetljiva je i na neaktivne oblike virusa, kod kojih nema vanjskih manifestacija u obliku genitalnih bradavica i papiloma.
Na čemu se temelji metoda?
Na temelju proučavanja pacijentove DNK kako bi se otkrila prisutnost stranih komponenti u ovom lancu. Sastoji se od četiri nukleotida, koji su raspoređeni u određenom slijedu. Ako virus uđe u tijelo, dolazi do promjene redoslijeda u ovom lancu, što vam omogućuje da pažljivo pratite aktivnost čak i najbeznačajnijih stranih čestica. Tehnika HPV PCR istraživanja provodi se pomoću virusnih čestica, koje određuju brzinu stanične diobe.
Što definira istraživanje?
Ovaj dijagnostički princip omogućuje praćenje aktivnosti HPV-a ne samo dok je u pasivnom stanju, već i tijekom razdoblja inkubacije. PCR dijagnostika utvrđuje:
- prisutnost HPV-a u tijelu;
- sojevi koji inficiraju pacijenta;
- kvantitativni sadržaj u tijelu.
Papilomavirus zarazio je većinu ljudi, ali snažna imunološka obrana potiskuje njegove manifestacije i ne dopušta da se razmnožavaju. Dakle, otkrivanje HPV-a na kvalitativni način ne može uvijek biti opravdano, jer nije racionalno ako su virusne čestice prisutne u tijelu, ali je njihov utjecaj toliko minimalan da ni na koji način ne šteti osobi. Kvalitativna analiza pokazuje pozitivan rezultat, a to čovjeka često zbuni.
Kvantitativna metoda
Zato se za dijagnozu najčešće koristi kvantitativna metoda koja vam omogućuje praćenje broja virusnih agenasa u tijelu i utvrđivanje koliko je njihovo djelovanje opasno. Osim toga, važno je utvrditi raznolikost sojeva HPV-a. Dijele se prema stupnju onkogenosti: neki mogu postati glavni čimbenik u nastanku onkoloških bolesti, dok su drugi apsolutno sigurni i mogu uzrokovati samo neke kozmetičke probleme.
Svaka pojedinačna situacija zahtijeva individualni pristup,stoga je prije podvrgavanja ovom laboratorijskom testu preporučljivo konzultirati se s kvalificiranim stručnjakom koji će vam reći kako i za koje sojeve bi bilo najbolje testirati, uzimajući u obzir stanje pacijenta i kliničke simptome.
Indikacije za provođenje
Najznačajniji razlog za podvrgavanje PCR testu na HPV je prisutnost bradavica na tijelu.
Zaraza ovim virusom moguća je samo od osobe. Nakon prodiranja u krvotok, patogeni mikroorganizam počinje se razmnožavati u gornjim slojevima kože, što dovodi do razvoja karakterističnih manifestacija - stvaranja kondiloma ili papiloma. Budući da je ova bolest prilično česta i javlja se u gotovo 80% populacije, vjerojatnost zaraze je iznimno velika. Papiloma virusi se prenose putem:
- nezaštićeni snošaj;
- dok se ljube;
- pri rođenju djeteta od mame;
- na kućni način;
- u bliskom kontaktu s kožom.
Glavne indikacije za analizu krvi i PCR bris na HPV su kožni simptomi ove bolesti, koji izgledaju kao viseće bradavice na tankoj stabljici poput niti. Čak i ako se takvi kondilomi ne primjećuju na koži, virus i dalje može biti prisutan u krvi, ali će njegov tijek biti asimptomatski. Ako je pacijentu dijagnosticirana infekcija papiloma virusom 18. i 16. podtipa, preporuča se redovito kontrolirati specijaliste poput ginekologa i urologa, podvrgnuti se dijagnostičkim postupcima i testiranju na HPV, jerSamo pravovremenom dijagnozom moguće je spriječiti razvoj određenih karcinoma.
Vrste tehnika
U sklopu PCR dijagnostike HPV-a razvijene su četiri glavne metode testiranja, od kojih svaka ima neke specifičnosti i propisuje se uzimajući u obzir stanje bolesne osobe. Za odabir najbolje metode potreban je savjet stručnjaka. Dakle, četiri metode:
- Kvalitativna metoda koja se koristi za pobijanje ili potvrdu prisutnosti virusa u tijelu. Njegov glavni nedostatak je nemogućnost utvrđivanja vrste HPV soja (samo 14-21 tip). Najčešće se kvalitativna metoda koristi istodobno s drugim metodama za otkrivanje papiloma virusa. Rezultat se prijavljuje pomoću dvije ocjene: "nije pronađeno" ili "otkriveno". Odnosno, ova tehnika ili navodi prisutnost strane DNK, ili ukazuje na njenu odsutnost.
- Genotipizacija je metoda kojom se može utvrditi prisutnost virusa u ljudskom tijelu i utvrditi njegovu raznolikost. Ova metoda se koristi u slučajevima kada je potrebno utvrditi ostaje li DNK virusa nakon tretmana ili se uočava recidiv kao posljedica nove infekcije. Genotipizacija pomaže u procjeni učinkovitosti terapije određivanjem tipa HPV-a. Ako se radi o istom soju od kojeg je pacijent liječen, onda je liječenje bilo neuspješno. Ako analiza pokaže prisutnost druge vrste HPV-a, to može ukazivatiponovna infekcija.
- Kombinirana metoda, koja je visoko specijalizirana dijagnostička metoda koja se temelji na kombinaciji kvalitativne detekcije 16 sojeva pomoću genotipizacije. Rezultat se može predstaviti s 3 odgovora: “otkriven soj 16”, “nije otkriven” i “otkriven je uključujući HPV tip 16”. Ova metoda se koristi kada sumnjate na prisutnost vrste papiloma virusa koji može uzrokovati rak vrata maternice kod žena.
- Kvantitativna PCR metoda za HPV visokog onkogenog rizika, koja vam omogućuje određivanje razine virusa u krvi i praćenje njegovog razvoja. Smatra se najinformativnijim, jer vam omogućuje određivanje težine patološkog procesa, na temelju čega se odabire ispravan tretman. Tehnika se temelji na određivanju broja virusnih stanica unutar proučavanih 100 tisuća. Ako je njihov ukupan broj veći od 5, to ukazuje na visoku koncentraciju papiloma virusa u tijelu, što povećava vjerojatnost nastanka stanica raka. Ako je iznos manji od 3, koncentracija se smatra zanemarivom.
Kako se pripremiti i položiti test?
Krv se može uzeti kao biomaterijal za HPV, ali se najčešće uzimaju izlučevine iz uretre kod muškaraca i cerviksa kod žena.
Nije potrebna posebna priprema za PCR za HPV. Glavni uvjet je ne mokriti nekoliko sati prije zahvata. Osim toga, preporučljivo je ne imati spolni odnos 2-3 dana prije studije i neuzimati alkoholna pića. Pritom ne zaboravite na intimne higijenske postupke.
Za muškarce
Muškarci uzimaju bris - glava penisa i uretra se tretiraju fiziološkom otopinom. Specijalist koristi posebnu četku, koja se ubacuje u mokraćnu cijev za oko 4 cm. Biološki materijal se skuplja laganom rotacijom, stavlja u epruvetu i šalje u laboratorij na istraživanje. Istovremeno, možete ga pohraniti najviše 2 dana od trenutka preuzimanja.
žene
Razmaz za PCR analizu na HPV kod žena provodi se na sljedeći način: sterilna otopina se nanosi na cerviks, zatim se četkom uzima bris iz cervikalnog kanala. Uređaj se ubacuje na dubinu od približno 1 cm, nakon čega liječnik rotacijskim pokretima struže stijenke kanala. Biološki materijal se stavlja u posebnu epruvetu, gdje stoji oko 15 sekundi. U njemu ga stručnjak briše o zidove, a zatim ga vadi. Zatim se sadržaj epruvete šalje na laboratorijsko ispitivanje.
Pravilno uzimanje uzoraka materijala za istraživanje ključ je uspješne dijagnoze i dobivanja pouzdanog rezultata. Ako se u isto vrijeme naruši sterilnost, a strani mikroorganizmi prodru u epruvetu, tijekom analize može se prepoznati virus, koji zapravo nije u tijelu pacijenta. Do pogreške može doći i zbog male količine materijala uzetog za istraživanje.
Gdje uzeti PCR za HPV, mnoge ljude zanima. Testovi se mogu napraviti u bilo kojoj medicinskoj ustanoviklinici ili laboratoriju, na primjer, u "Invitro" ili "Hemotest".
Prednosti metode
PCR je jedna od glavnih dijagnostičkih metoda i trenutno ostaje najpopularnija među liječnicima. Ova studija se provodi ne samo za otkrivanje HPV-a, već vam također omogućuje otkrivanje drugih patoloških mikroorganizama koji se mogu prenijeti spolnim kontaktom. Takva analiza pomaže u dijagnosticiranju skrivenih infekcija, hepatitisa itd. PCR test na HPV ima niz prednosti u odnosu na druge metode otkrivanja bolesti. Ove pogodnosti su:
- Visoka specifičnost. Analiza pomaže odvojiti tragove strane DNK s velikom vjerojatnošću prilikom proučavanja prikupljenog biomaterijala.
- Visoka izvedba. PCR studija je automatizirani proces koji pomaže u provođenju studije izravno na dan analize. Ova brzina omogućuje osobi da se ne brine o rezultatima dugo vremena i da ga dobije u svoje ruke za nekoliko dana.
- Visoka osjetljivost. Testiranjem je moguće istražiti aktivnost virusa čak i tijekom razdoblja inkubacije, kada su njihove koncentracije vrlo niske. To pomaže spriječiti nastanak patološkog procesa i započeti pravovremenu terapiju.
- Mogućnost provođenja nekoliko analiza odjednom. Na temelju jednog uzetog uzorka krvi može se provesti dijagnostika za određivanje nekoliko bolesti odjednom. Na primjer, možete istovremenoidentificirati uzročnika gonoreje i klamidije. Istovremeno, ovaj postupak neće moći negativno utjecati na pouzdanost rezultata.
Mane studije
Unatoč velikoj popularnosti i informativnosti ove analize, postoje neki negativni aspekti PCR dijagnostike za HPV. Glavni među njima je vjerojatnost lažno pozitivnih rezultata. To se događa kada je terapija već provedena, infekcija je uništena, ali mrtve virusne stanice i dalje ostaju u tkivima tijela. Obnova stanica traje neko vrijeme. Ako provedete studiju prije 2-3 mjeseca nakon liječenja, PCR može pokazati pozitivan rezultat. Tehnika ne uočava nikakve razlike, jer je usmjerena na potragu za virusnom DNK, koja se može pronaći čak iu već mrtvim stanicama. To doprinosi lažno pozitivnim rezultatima. Ova se situacija može izbjeći ako se laboratorijski test provede u roku koji odredi liječnik.
Transkript
Što će pokazati PCR dešifriranje za HPV?
Liječnik bi trebao protumačiti rezultate testa. No također je važno da pacijent bude svjestan strukture lista s rezultatima. Ako analiza pokazuje da "DNA nije otkrivena", onda u krvi nema papiloma virusa. Ako je indikator Lg 5 ili više, to ukazuje na njegovu visoku koncentraciju u krvi, Lg 3-5 - značajna količina, manje od 3 - beznačajna količina.
Lažno negativna analiza
Također,može doći do lažno negativne analize. To se događa ako:
- prikupljeni biološki materijal je nepropisno pohranjen ili transportiran;
- sterilni uvjeti su narušeni, a drugi mikroorganizmi su ušli u primljenu krv pacijenta;
- zbog neprikladnosti reagensa.
Kako bi se otklonila mogućnost lažno negativnih rezultata, potrebno je odabrati ovlašteni laboratorij s visokokvalificiranim osobljem za ovu analizu.
Detaljno smo ispitali kako i zašto se provodi PCR dijagnostika. O čemu se radi sada je jasno.
