Aglutinacija krvi je aglutinacija i sedimentacija crvenih krvnih stanica, bakterija i drugih stanica koje nose antigene.
Proces se odvija pod utjecajem aglutinina, koji su specifične tvari. Lektini ili antitijela djeluju kao te tvari.
Moguće vrste aglutinacije pri određivanju krvne grupe
Aglutinacija je specifična i nespecifična. U prvom slučaju, reakcija se događa uz sudjelovanje tri komponente:
- antigeni;
- antitijela;
- elektroliti (koristite izotoničnu otopinu).
Pri određivanju krvne grupe koriste se sve moguće vrste aglutinacije, ali to nije jedini slučaj.
U koju svrhu se koristi?
Test aglutinacije krvi koristi se za identifikaciju uzročnika zarazne bolesti. Istodobno se taloži, a u sedimentu ga je lako otkriti. Ovaj proces se koristi, kao što je gore spomenuto, u određivanju krvne grupe. O tome ćemo dalje raspravljati.
Koje su značajke?
Eritrociti sadrže antigene tipa A i B. Onivežu se na antitijela ά i β, respektivno. Krvne grupe i reakcije aglutinacije:
- 1, 0 (ά, β) - nema antigena na površini eritrocita;
- 2, A (β) – antigen A i antitijelo β prisutni;
- 3, B (ά) - sadrži antigen B i antitijelo ά;
- 4, AB (00) – dva antigena prisutna, bez antitijela.
Vrijedi napomenuti da su antigeni već uočeni u embriju. Što se tiče antitijela, ona se pojavljuju nakon rođenja, u prvom mjesecu života.
Kompatibilnost ljudi ovisi o krvnoj grupi. To je razlog odbijanja fetusa od strane majčinog tijela. Drugim riječima, ona ima antitijela na krvne antigene nerođenog djeteta. U tom slučaju dolazi do nekompatibilnosti. Osim toga, kod transfuzije se mora uzeti u obzir krvna grupa.
Priprema
Krvne grupe i reakcije aglutinacije su kompatibilni pojmovi koji se često koriste u medicini.
Prije testiranja važno je slijediti određene upute. Potrebno je privremeno isključiti korištenje određenih namirnica i lijekova. To će pomoći da rezultati budu točniji. Preporuke koje treba slijediti propisuje liječnik. Činjenica je da različiti laboratoriji možda nemaju iste raspone dobivenih vrijednosti, odnosno neznatno se razlikuju.
Uvjeti ispitivanja
Kako bi se krvna grupa mogla točno odrediti, važno je odabrati pravu opremu. To uključuje:
- fiziološka otopina i pipeta;
- staklene šipke;
- standardni izohemaglutinirajući serumi;
- suhe zemljane ploče koje su podijeljene u 4 sektora.
Postoje zahtjevi za uvjete testa:
- dnevno svjetlo;
- sobna temperatura iznad +16 ˚S;
- koristeći volumen krvi i seruma u omjeru 1:10;
- Pouzdani rezultati unutar 5 minuta.
Gore su glavni uvjeti i alati. Aglutinacija krvi može se provesti na nekoliko načina, a svaki od njih postavlja individualne zahtjeve.
Metode
Moguće metode za određivanje krvne grupe pomoću aglutinacije:
- standardna metoda;
- unakrsna reakcija;
- upotreba tsoliklona;
- ekspresna metoda pomoću skupa "Erythrotest-Groupcard".
Standardna metoda
Aglutinacija krvi se očituje korištenjem crvenih krvnih stanica pacijenta. Koriste se i standardni serumi koji sadrže poznate antigene.
Jedna kap od četiri seruma stavlja se na ravnu ploču. Zatim se pomoću staklenih štapića u nju unosi krv pacijenta za pregled. U ovom slučaju, prikladno je koristiti kapaljke. Omjer bi trebao biti 1:10. Serum i krv se nježno miješaju. Procjena se može izvršiti u roku od pet minuta.
Dešifriranje rezultata testa jednostavnom metodom
Nakon određenog vremenau kapima seruma uočava se prosvjetljenje. U nekima možete vidjeti da je došlo do aglutinacije eritrocita (male ljuskice), u drugima je nema.
Postoje sljedeće opcije:
- bez reakcije u svim uzorcima seruma − 1 grupa;
- zgrušavanje se dogodilo posvuda osim za 2. uzorak - grupa 2;
- bez reakcije samo u 3. uzorku - 3. skupini;
- aglutinacija se dogodila posvuda – grupa 4.
Dakle, glavna stvar je pravilno rasporediti serum. Tada neće biti teško dešifrirati rezultat. Ako je aglutinacija krvi slaba, preporuča se ponovno testiranje. U slučaju malih pahuljica, one se ispituju pod mikroskopom.
Unakrsna reakcija
Ponekad je nemoguće točno odrediti krvnu grupu na jednostavan način. Aglutinacija se u ovom slučaju provodi metodom unakrsne reakcije. Za razliku od prve verzije testa, ovdje su važni standardni eritrociti. Krv pacijenta se skuplja u epruvetu, centrifugira, a zatim se serum ispumpava pipetom radi daljnjeg istraživanja.
Stavlja se na tanjur u količini od 2 kapi, zatim mu se dodaju standardna crvena krvna zrnca grupa A i B. Sadržaj se miješa protresanjem posude.
Rezultati metode unakrsne reakcije
Nakon pet minuta, uzorci su spremni za pregled. Opcije su:
- došlo je do lijepljenja u obje kapi – 1 grupa;
- pahuljice nisuuočeno ni u jednom od uzoraka – grupa 4;
- proces je vidljiv u jednom uzorku - 2 ili 3 grupe (ovisno o tome gdje se točno krv zgrušala).
Coliclon metoda
Za određivanje krvne grupe, aglutinacija se na ovaj način provodi korištenjem sintetskih nadomjestaka seruma. Zovu se tsoliklones. Sadrže umjetne zamjene za ά i β-aglutine poznate kao eritrotesti (ružičaste, odnosno plave). Reakcija se odvija između njih i pacijentovih crvenih krvnih stanica.
Ova metoda je najtočnija i najpouzdanija. Uglavnom, ne zahtijeva ponovno ispitivanje. Ocjenjivanje rezultata provodi se na isti način kao i u slučaju standardne metode. Posebnost je da se četvrta krvna grupa nužno mora potvrditi reakcijom sa specifičnom sintetskom zamjenom (anti-AB). Osim toga, ne pokazuje lijepljenje kada se doda otopina natrijevog klorida.
Express-metoda sa skupom "kartica grupe za eritrotest"
S obzirom na moguće metode analize u određivanju krvne grupe, vrijedi napomenuti da ova metoda ima svoje karakteristike. Oni leže u činjenici da se rezultat može ocijeniti ne samo u laboratoriju, već i na terenu. Za studiju se koristi poseban set. Sadrži karticu bunara s osušenim reagensima koji su već prisutni na dnu. Uz anti-AB, anti-A i anti-B, anti-D se koristi za određivanje Rh faktora.
Ova metoda ne zahtijeva posebnu pripremu, dopušteno je koristiti krv iz prsta, dopušteno je prisustvo konzervansa u njoj. Prvo trebate dodati kap vode u svaku jažicu da se sastojci otopi. Nakon toga se dodaje krv, lagano promiješa. Za tri minute bit će primljen rezultat.
Lažna aglutinacija
Ponekad podaci dobiveni nakon testa nisu istiniti. Ovaj fenomen ovisi o određenim čimbenicima.
Postoje tri vrste lažne reakcije:
- Pseudoaglutinacija. Do pravog povezivanja ne dolazi, eritrociti se jednostavno presavijaju u obliku novčića. Ako dodate par kapi fiziološke otopine, one se raspadaju. Sličan se fenomen prepoznaje pod mikroskopom.
- Hladna aglutinacija krvi. Takva se reakcija opaža ako su uvjeti za studiju bili nepovoljni. Kada je temperatura ispod +16˚C, može doći do lijepljenja.
- Panaaglutinacija. Ako postoji infekcija u krvi, rezultati testa mogu biti lažni. Ova pojava je moguća i u slučaju onkoloških bolesti, sa sepsom.
Aglutinacija je vrlo važna u medicini. Omogućuje ne samo određivanje krvne grupe, već i identificiranje uzročnika bolesti, kao i prisutnost infekcija. Glavna stvar je slijediti preporuke liječnika prilikom pripreme za ovaj postupak. Što se tiče medicinskog osoblja, njihova je zadaća stvoriti povoljne uvjete ipoštivanje svih pravila. To je jedini način da se postignu točni rezultati pri izvođenju aglutinacije krvi.
