Metoda preimplantacijske genetske dijagnoze koristi se za procjenu zdravstvenog stanja embrija dobivenog in vitro oplodnjom prije implantacije u šupljinu maternice. Metoda omogućuje ne samo odabir zdrave buduće bebe, već i povećanje šanse za trudnoću. Tehnika se široko koristi u svim svjetskim klinikama koje se bave in vitro oplodnjom.
Opći koncepti
Genetska dijagnoza prije implantacije omogućuje vam da provedete sveobuhvatan pregled i isključite prisutnost kromosomskih abnormalnosti općenito ili bilo koje specifično odstupanje. Nedavno se, paralelno s ranim defektima, provjeravaju geni koji mogu izazvati pojavu tumora u odrasloj dobi (jajnici, crijeva, dojke).
U slučaju nositelja genomskih bolesti s majčine strane, biopsija nekoliko polarnih tijela jajne stanice radi se i prije oplodnje. Opisane metode su alternativa ranoj prenatalnoj dijagnostici, koja vam omogućuje da upozorite na pobačaj ako fetus iznenada ima genetske patologije.
Genetska dijagnoza prije implantacije omogućuje vam određivanje spola buduće bebe već u procesu probira. Ovo se koristi za sprječavanje razvoja spolno povezanih anomalija.
Kako se genetske bolesti nasljeđuju
Razlikujte nasljedne patologije koje su nastale prema dominantnom, recesivnom i x-vezanom tipu.
| Vrsta nasljeđivanja | Značajke | Rizik od bolesne bebe |
| Dominantna | Jedan od partnera ima jedan defektan gen koji je dominantan u njihovom paru | 50% nasljeđuje gen |
| recesivno | Oba partnera nose isti defektni gen, ali imaju normalan par | 50% postati nositelj, 25% dobiti bolest |
| X-povezano | Žene su zaštićene od patologije svojim skupom kromosoma i isključivo su nositeljice. Muškarce karakterizira razvoj anomalije | muškarac ima 50% šanse da naslijedi gen i bolest, žena ima šansu da postane nosilac poput svoje majke - 50% |
Tko se provjerava?
Preimplantacijska genetska dijagnoza (PGD) provodi se u sljedećim slučajevima:
- Prisutnost jedne ili obje nasljedne bolesti ili promjene u kariotipu. Često i sami partneriznaju za svoje probleme, rjeđe saznaju tijekom procesa probira.
- Ponovljeni pobačaj. Problem u tome nisu anomalije od strane roditelja (možda uopće nisu), već genetske mutacije fetusa koje uzrokuju pobačaje.
- Dob osoba koje prolaze kroz IVF program je iznad 38 godina.
- Povijest više od 3 neuspješna pokušaja IVF-a.
- Muška neplodnost.
- Uključivanje ICSI (intracitoplazmatska injekcija spermija) u program oplodnje. Proces je pun razvoja genetskih abnormalnosti u embriju.
- Povijest hydatidiform madeža.
Značajke PGD-a
Istraživanja u području preimplantacijske genetske dijagnoze sugeriraju da metoda ima pravo na postojanje, pomaže u dijagnosticiranju i sprječavanju kromosomskih abnormalnosti, međutim, zahtijeva daljnje poboljšanje.
Značajke PGD-a su sljedeće:
- Stopa pobačaja sa probirom niža je nego bez probira;
- trenutačno nema dokaza koji povećavaju mogućnost trudnoće;
- postoji mogućnost lažnog rezultata: embrij je zdrav, ali rezultat pokazuje odstupanja, embrij je bolestan, ali studija kaže drugačije (5-10% slučajeva).
Genetska dijagnoza prije implantacije (pregled blastomera)
Nakon dogovora za vantjelesnu oplodnju, reproduktivni specijalist procjenjuje potrebuPGD za bračni par. Ako je navedeno, partneri se mogu dogovoriti ili odbiti postupak. Zatim se potpisuje dokument kojim se potvrđuje dopuštenje za provođenje ankete.
Treći dan nakon oplodnje embrija, genetičar uzima jednu od formiranih stanica blastomera na analizu. Vjeruje se da to nema posljedica za fetus, jer su sve stanice zamjenjive.
Specijalist provodi istraživanja u jednom od prethodno odabranih područja: proučavanje strukture stanice pod posebnim fluorescentnim mikroskopom, DNK testiranje metodom lančane reakcije polimeraze kako bi se utvrdila prisutnost mutacije.
Na temelju rezultata, embriji s abnormalnostima neće se koristiti u procesu implantacije. Odabrano zdravo i kvalitetno. Zatim se jedan ili više njih prenosi u majčinu maternicu.
Kada se dogodi biopsija polarnog tijela, ispituje se majčin kromosomski set. Provodi se u slučaju da se otkrije prisutnost genetski uvjetovane patologije duž ženske linije. Postupak vam omogućuje da utvrdite je li jaje zdravo, koje će se koristiti za oplodnju, bez kršenja njegove strukture. Ako se ne otkriju abnormalnosti, može se koristiti za oplodnju i prijenos u šupljinu maternice.
Postoje slučajevi kada se provjeravaju polarna tijela, a zatim blastomeri. To vam omogućuje da dobijete pouzdaniji rezultat. Shemu prema kojoj će se pregled provesti odabire stručnjakgenetičar.
Korišćene metode
Brojčane i strukturne abnormalnosti kromosoma određuju se metodom fluorescentne hibridizacije. Ova metoda vam omogućuje da odredite sekvencu DNK stanice. Koriste se posebne DNK sonde, koje su po svojoj strukturi komplementarna mjesta za DNK zone blastomera.
Sonda sadrži nukleotid i fluorofor (molekula sposobna za fluorescenciju). Nakon interakcije ciljne DNK s DNA sondom, formiraju se osvijetljena područja koja se promatraju pod fluorescentnim mikroskopom.
Upotrijebite i PCR metodu (lančana reakcija polimeraze). Sastoji se od kopiranja dijela DNK pomoću enzima u određenim laboratorijskim uvjetima.
Dijagnoza aneuploidije
Ovo je jedna od metoda preimplantacijske genetske dijagnoze, koja omogućuje otkrivanje prisutnosti brojčanih kromosomskih abnormalnosti (identificiranje dodatnih kromosoma ili kromosoma koji nedostaju).
Genetski materijal sastoji se od 46 kromosoma, od kojih polovicu daje otac, a drugu polovicu majka. Ako embrij dobije dodatni kromosom, to se naziva trisomija, a gubitak bilo kojeg naziva se monosomija. Ovi nedostaci mogu rezultirati:
- nedostatak implantacije embrija;
- pobačaj;
- nasljedne patologije (Downov sindrom, Klinefelter, Shereshevsky-Turnerov sindrom).
Muška neplodnost i dob paračesti su čimbenici u razvoju takvih anomalija.
PGD monogenih patologija
Preimplantacijska genetska dijagnostika embrija radi utvrđivanja prisutnosti monogenih bolesti provodi se u obiteljima u kojima je utvrđena prisutnost nasljednih anomalija. Ako par već ima bebu s homogenom bolešću, tada se prilika za rođenje još jednog bolesnog djeteta povećava nekoliko puta.
Uzrok je kršenje slijeda kromosoma u određenom dijelu DNK. Ove bolesti uključuju:
- cistična fibroza;
- adrenogenitalni sindrom;
- fenilketonurija;
- hemofilija;
- anemija srpastih stanica;
- Wernig-Hoffmanov sindrom.
Prednosti i rizici metode
Genetska dijagnoza prije implantacije, koja se smatra dvosmislenom, ima određene prednosti u području prenatalnog probira:
- u maternicu se prenose samo visokokvalitetni i zdravi embriji;
- smanjuje rizik od rođenja djeteta s genetskim abnormalnostima;
- prepoloviti rizik od pobačaja;
- prepoloviti rizik od višeplodne trudnoće;
- 10% više šanse za implantaciju embrija;
- 20% povećanje šanse za uspješno rođenje djeteta.
Rizik od nenamjernog oštećenja embrija tijekom PGD-a je 1%. Vjerojatnost pogrešnog rezultata je 1:10, osim toga, 3% šanse da će embrij s bilo kojom anomalijom biti ocijenjen zdravim.
Vjerojatnost da će imati zdrav embrijodstupanja - 1:10. 1:5 mogućnost da će prijenos embrija u šupljinu maternice biti otkazan zbog pronađenih anomalija u svakoj od njih.
Kontraindikacije
Preimplantacijska genetska dijagnoza (PGD), čije posljedice za embrij nisu jasno identificirane, ima niz kontraindikacija za provođenje:
- fragmentacija embrija više od 30% (formiranje fragmenata do 25% smatra se normom);
- prisutnost višenuklearnih blastomera u embriju;
- embrij ima manje od 6 blastomera trećeg dana svog razvoja.
Sigurnost metode
Dijagnoza se provodi u ranoj fazi stvaranja budućeg organizma, kada su sve njegove stanice pluripotentne, odnosno iz svake se može formirati punopravan zdrav organizam.
Svi tekući PGD koraci ne uzrokuju vrijeme embriju, fetusu i nerođenom djetetu. Nakon što se dobije uzorak za istraživanje, priprema se na poseban način. Stanice se stavljaju na stakalce, na koje su fiksirane, ili u pufersku otopinu.
Trošak postupka
Genetska dijagnoza prije implantacije, čija cijena varira od 50 do 120 tisuća rubalja, na prvi pogled izgleda kao skupa manipulacija. Međutim, zdravlje i liječenje djeteta s genetski određenim patologijama koštat će puno više.
Procedura daje sve prednosti u odnosu na žene koje su mogle začeti dijete prirodnim putemnačin, budući da im takva dijagnostička metoda nije dostupna. Predimplantacijska genetska dijagnoza, čija je cijena zanemariva u usporedbi sa samom vantjelesnom oplodnjom, služi samo kao dodatak općem programu koji omogućuje ne samo izdržati i roditi, već i odgojiti zdravu bebu.
